MEC-1人粘液表皮樣癌細胞培養(yǎng)方法

MEC-1人粘液表皮樣癌細胞培養(yǎng)方法細胞庫管理規(guī)范提供上萬種，原代細胞、ATCC細胞細胞系、細胞珠、細胞、細胞貼壁細胞、懸浮細胞等提供參考文獻和優(yōu)培養(yǎng)條件，為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復勞動的時間和精力，我們有過硬的技術咨詢和完善的售后服務，為您解決后顧之憂。

細胞復蘇

＆ 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后（大概1-1.5分鐘），拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。

＆ 把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中（用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來），1000轉離心5分鐘。

＆ 把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。

＆ 標好細胞種類和日期、培養(yǎng)人名字等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。

＆ 3天換一次培養(yǎng)基。

傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。

培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究zui常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細胞進行培養(yǎng)。由于細胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。

上海晶抗生物全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息，專業(yè)的技術支持您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾！培養(yǎng)的前一周內出現(xiàn)質量問題，客戶可憑細胞的照片以及書面形式的細胞培養(yǎng)，實驗操作過程提供給我司。經(jīng)技術人員核實認定為可以予以重發(fā)的情況，由我司再免費提供一次細胞。

實驗無菌技術：

＆ 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺（laminar flow） 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。

＆ 每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢

＆ 將實驗物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株的操作。

＆ 無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。

＆ 實驗用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的中央無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。

＆ 小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。

＆ 容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

＆ 工作人員應注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。

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