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Ovary人卵巢癌細胞培養(yǎng)方法

更新時間:2021-11-13

簡要描述:

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細胞培養(yǎng)過程中,從實驗室的設計到實驗過程中的操作,都需要嚴格控制無菌。由于細胞對于生長的條件比較苛刻,所以無論從實驗室的設計,還是使用的物品及細胞培養(yǎng)的操作過程,都要注意保持無菌環(huán)境。


傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。


培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細胞進行培養(yǎng)。由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務于臨床實踐。


實驗器皿:

玻璃瓶及相應的膠塞或膠木螺旋蓋

用培養(yǎng)瓶、蓋玻片

移液管、吸管、燒杯、離心管和培養(yǎng)皿

塑料培養(yǎng)皿(35mm)、塑料培養(yǎng)板(6、24、96孔)

注意 : 培養(yǎng)用的蓋玻片必須不含鉛、不發(fā)霉,可用0.2N鹽酸浸泡10分鐘,小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞 Bend3細胞用蒸餾水洗2次,每次10分鐘,然后移入丙酮或乙醇浸泡10分鐘,再用雙蒸水洗2次,每次10分鐘,烘干待消毒。凡組織學用過的舊蓋玻片一般不用,從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞。


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服務流程:

預約登記→

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