ELISA試劑盒樣品搜集、處理及保存辦法:
1)血清-----操作過程中防止任何細(xì)胞影響。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地別離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)安排勻漿-----將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------假如樣品不當(dāng)即運(yùn)用,應(yīng)將其分紅小部分-70 ℃保存,防止重復(fù)冷凍。盡可能的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。應(yīng)在室溫下凍結(jié)并確保樣品均勻地充沛凍結(jié)。
ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽闡明書貯存,運(yùn)用前康復(fù)到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應(yīng)丟掉,不行保存。
2)試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)當(dāng)即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。
3)不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前運(yùn)用。
4)運(yùn)用一次性的吸頭防止穿插污染,汲取停止液和底物A、B液時(shí),防止運(yùn)用帶金屬部分的加樣器。
5)運(yùn)用干凈的塑料容器裝備洗刷液。運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗刷酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
7)底物A應(yīng)蒸發(fā),防止長(zhǎng)期翻開蓋子。底物B對(duì)光靈敏,防止長(zhǎng)期暴露于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗(yàn)完成后應(yīng)當(dāng)即讀取OD值。
8)參加試劑的順序應(yīng)共同,以確保一切反響板孔溫育的時(shí)刻相同。
9)按照闡明書中標(biāo)明的時(shí)刻、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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