ELISA試劑盒準確的處理樣本是確保ELISA查看的準確性和準確性的*步,下面就簡略介紹一下不一樣類型的樣本的處理辦法。
血清
血清是zui常用于ELISA查看的一類樣本,處理也比較簡略。
將上清分裝多份,-20℃或-80℃保留,防止重復凍融。防止運用溶血或高血脂的標本。
常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,查看時還應細心閱讀試劑盒說明書,查看試劑盒是不是對抗凝劑有特殊要求。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管收集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃放置一晚,使血清分出。
4℃ 1000×g離心20分鐘,細心收集上清。
一起也應防止細菌污染,由于菌體內(nèi)可能富含內(nèi)源性的HRP然后致使查看的假陽性。
一般咱們可用于ELISA查看的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不一樣類型的查看樣本前期的處理辦法是不一樣的。
ELISA試劑盒血漿
用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標本,標本收集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。
為了確保查看的準確性,保留于-20℃或-80℃的樣本在1~6個月內(nèi)查看;
4℃保留的樣本應在1周內(nèi)進行查看。別的,還應確保樣本不含NaN3,由于NaN3會抑制HRP的活性,然后致使假陰性的成果。
細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除掉細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保留,防止重復凍融。
尿液、唾液等別的液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可查看。
ELISA試驗成功的條件是樣本的準確處理加上試驗途中準確的操作,準確的處理樣本是確保ELISA查看的準確性和準確性的*步。
總的來說,由于ELISA只能查看可溶性蛋白的含量,所以應確保一切樣本均為弄清的液體,沉積或懸浮物都應離心去掉。
建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保留,防止重復凍融。
ELISA試劑盒采血過程中應防止溶血,由于紅細胞裂解時會開釋具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的ELISA查看中會有非特異性的顯色,而致使查看的不準確性。
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