根據(jù)檢測目的和ELISA試劑盒操作步驟不同,有以下三種類型的常用方法:3.1間接法 此法是測定抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標本(含相應抗體)與之結(jié)合。洗滌后,加人酶標抗球蛋白抗體(酶標抗抗體)和底物進行測定。3.2雙抗體夾心法 此法常用于測定抗原。
將已知抗體吸附于固相載體,加人待檢標本(含相應抗原)與之結(jié)合。溫育后洗滌,加人酶標板中。3.3競爭法 此法可用于抗原和半抗原的定量測定,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,將ELISA試劑盒特異性抗體吸附于固相載體。加入待測抗原和一定量的酶標已知抗原,使二者竟爭與固相抗體結(jié)合;經(jīng)過洗滌分離,zui后結(jié)合于固相的酶標抗原。
一、酶聯(lián)免疫吸附法測定抗體含量(競爭法)1、儀器設備酶聯(lián)免疫檢測儀(Bio-550);酶標板 (96孔);微量注射器。2、試劑(1)HRP標記羊抗兔Ig G(1:1 000,國產(chǎn));標準牛IgG;兔抗牛血清(1:256);(2)包被液:0.05mol/L pH9.6碳酸緩沖液,4℃,保存, Na2CO3 0.15g, NaHCO3 0.293g,蒸餾水稀釋至100 mL。 (3)ELISA試劑盒稀釋液與洗滌液:0.01mol/LpH7.4 PBS--Tween--20, 4℃,保存。NaCl 8g, KH2PO4 0.2g, Na2HPO4&12H2O 2.9g, Tween20,0.5mL。蒸餾水加至1000mL。
上海晶抗生物工程有限公司
地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號9幢2441室
版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司 備案號:滬ICP備16026504號-5 總訪問量:536099 站點地圖 技術支持:智慧城市網(wǎng) 管理登陸