把細胞系養(yǎng)好的三個關鍵要素是:良好的細胞來源,正確的實驗操作,以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系"就是要創(chuàng)造適合細胞生長的環(huán)境,給細胞建立一個滿意的“家"。
細胞培養(yǎng)基本條件:
1.合適的細胞培養(yǎng)基
合適的細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
2.血清
目前,大多數合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細胞培養(yǎng)液中重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。
3.細胞培養(yǎng)溫度
維持培養(yǎng)細胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同。人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡。
4.無菌無毒細胞培養(yǎng)環(huán)境
無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質污染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡。因此,在體外培養(yǎng)細胞時,必須保持細胞生存環(huán)境無菌無毒,及時清除細胞代謝產物。
5.恒定的細胞生長溫度
維持培養(yǎng)細胞旺盛生長,必須有恒定適宜的溫度。
6.合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。
7.合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。